沖洗：  材料自固定液中取出后，需立即沖洗，使其中所有的固定液全部除去，以妨礙染色 有些固定液，如10%福爾馬林液、Bouin氏液固定的材料，若時(shí)間較短的話可不必沖洗。但時(shí)間過長亦需沖洗  3、脫水（37度恒溫箱）  所謂脫水就是利用脫水劑將組織內(nèi)的水分置換出來，以利于有機(jī)溶劑的滲入，這一過程稱為脫水。  脫水是否徹底，直接關(guān)系到組織是否能充分透明   脫水過度（原因是組織在純酒精內(nèi)時(shí)間過久，發(fā)生組織質(zhì)地發(fā)生變化）容易造成組織發(fā)脆。造成組織發(fā)脆的原因還有加溫（溫度超過36℃）、脫水劑內(nèi)加有丙酮、浸蠟用的石蠟

中二甲苯過多等等。一般我們總認(rèn)為組織發(fā)脆跟高濃度酒精有關(guān)，而忽視了與低濃度的酒精關(guān)系，其實(shí)低濃度的酒精具有強(qiáng)大的穿透力，比純酒精更容易滲透到組織塊內(nèi)部使之脫水，組織如果在低濃度酒精里充分脫水，在高濃度酒精里只需脫去從低濃度到高濃度之間的水份，因此，僅需短時(shí)間就可完成，如果這時(shí)不縮短純酒精的時(shí)間，便會引起組織發(fā)脆；如果脫水時(shí)加溫，使用丙酮，還可引起組織收縮，并影響免疫組織化學(xué)的標(biāo)記.

脫水：即脫去組織內(nèi)的水分，借著某些溶媒置換組織內(nèi)水分的過程。一般經(jīng)過固定的組織內(nèi)常含有較多的水分，而水是不能與蠟相混合的，因此，在浸蠟之前必須脫去組織塊中的水分。乙醇是最常用的脫水劑，可與水隨意混合，脫水能力強(qiáng)，并可硬化組織。其穿透組織的速度很快，常導(dǎo)致組織塊收縮、變脆。因而，在使用乙醇脫水的時(shí)候，應(yīng)先從低濃度開始，然后再依次遞增乙醇的濃度，使用不同濃度的乙醇逐步將組織塊內(nèi)的水分置換出來。

顯示葡萄糖-6-磷酸酶（G-6-Pase）活性的鉛法：

（Glucosel-phosphate phosphohydrolase）

①酶的定位及其生物學(xué)意義：

該酶主要位于內(nèi)質(zhì)網(wǎng)，是內(nèi)質(zhì)網(wǎng)的標(biāo)志酶。G-6-Pase參與糖謝，能水解葡萄糖-6-磷酸而釋放出葡萄糖和磷酸。

⑵原理：G-6-Pase將底物（葡萄糖-6-磷酸鉀鹽）水解產(chǎn)生磷酸離子，后者被孵育液中的硝酸鉛所捕獲，最終反應(yīng)物為顆粒狀的硫化鉛沉淀，其反應(yīng)式如下：

酶Pb(NO3)2

葡萄糖-6-磷酸鉀+H2O葡萄糖+磷酸

⑶結(jié)果：酶活性部位呈棕色硫化鉛顆粒沉淀。在光鏡下G-6-Pase活性顆粒較均勻地分布于胞質(zhì)中。