固定 具有凝固或沉淀組織蛋白的作用,因此能抑制酵解酶類的活動和xj的繁殖,從而呈現(xiàn)對組織的固定作用 (1)10%福爾馬林液:1份甲醛液 + 9份蒸餾水市場上出售的甲醛液約含37-40%的甲醛,10%福爾馬林液實際上僅含3.7-4.0%的甲醛 適用范圍:各種組織。但是經(jīng)10%福爾馬林液固定的組織,細胞核染色較好,而細胞質(zhì)染色較差 處理:組織塊一般固定24h以上,長時間亦可,甚至可用來長期保存組織塊。短時間固定的組織塊不需水洗,可直接轉(zhuǎn)入70%酒精脫水 (2)Bouin氏液: 苦味酸飽和水溶液(1.22%) 75ml 甲醛液 25ml 冰醋酸 5ml 適用范圍:各種動物組織及植物組織的根尖,是動物組織良好的固定液 處理:固定24h,也可在此液長期保存。流水沖洗或不經(jīng)水洗直接入70%酒精脫水。
切片 (1)切片刀或一次性切片刀片必須鋒利。使用切片刀時,必須精心磨備(在低倍目鏡下確認刀刃完好口);使用一次性切片刀片時,應(yīng)及時更新。 (2)載玻片必須潔凈、光明。 (3)將切片刀或刀片安裝在持刀座上(以15°為宜)。 (4)將蠟塊固定于持撐持器上,并調(diào)整蠟塊和刀刃至適當位置(刀刃與蠟塊表面呈5°夾角)。 (5)細心移動刀座或蠟塊撐持器,使蠟塊與刀刃接觸,旋緊刀座和蠟塊撐持器。 (6)修塊(粗切):用右手勻速旋轉(zhuǎn)切片機輪,修切蠟塊表面至bao埋此中的社團塊完備地全數(shù)切到。修塊粗切片的厚度為15~20μm。[注意:對于醫(yī)囑再次深切片(特別是在原切片中發(fā)現(xiàn)了有意義病變而進行的深切片),應(yīng)盡量少修塊,以盡量好地獲患上有關(guān)病變的連續(xù)性。]
透明:因脫水劑不能與bao埋介質(zhì)相溶,因而bao埋前應(yīng)用能與bao埋介質(zhì)相溶的化學(xué)試劑將組織中的脫水劑置換出來,該過程即為透明。在這個過程中,組織快中的乙醇被媒介溶劑(即透明劑,如二甲苯)取,因其折光率接近組織蛋白的折光率,光線可以透過,使組織塊呈現(xiàn)不同程度的透明狀。
二甲苯為無色透明液體,透明能力強,但易使組織塊收縮、變硬變脆,因此組織塊在二甲苯中時間不宜過長,以達到組織透明為度(組織塊呈現(xiàn)棕黃色或暗黃色透明狀即可)。另外,苯、甲苯與二甲苯性質(zhì)相似,也可作透明劑使用。二者對組織塊收縮較少,不易使組織硬化變脆,但透明速度慢,需要60min左右。氯仿的透明能力不如二甲苯,且揮發(fā)快,容易吸收水分,多用于大組織塊(厚1cm)的透明,透明時間為12-24h。