兔抗人UDP-N-乙酰葡糖胺：betaGal的β-1,3-N-二乙酰氨基3多克隆抗體多克隆抗體的概念  
1.抗原刺激機(jī)體，產(chǎn)生免疫學(xué)反應(yīng)，由機(jī)體的漿細(xì)胞合成并分泌的與抗原有特異性結(jié)合能力的一組球蛋白，這就是免疫球蛋白，這種與抗原有特異性結(jié)合能力的免疫球蛋白就是抗體。  
2.抗原通常是由多個(gè)抗原決定簇組成的，由一種抗原決定簇刺激機(jī)體，由一個(gè)B淋巴細(xì)胞接受該抗原所產(chǎn)生的抗體稱之為單克隆抗體（Monclone antibody）。由多種抗原決定簇刺激機(jī)體，相應(yīng)地就產(chǎn)生各種各樣的單克隆抗體，這些單克隆抗體混雜在一起就是多克隆抗體，機(jī)體內(nèi)所產(chǎn)生的抗體就是多克隆抗體；除了抗原決定簇的多樣性以外，同樣一類抗原決定簇，也可刺激機(jī)體產(chǎn)生IgG、IgM、IgA、IgE和IgD等五類抗體。  


兔抗人UDP-N-乙酰葡糖胺：betaGal的β-1,3-N-二乙酰氨基3多克隆抗體免疫動(dòng)物  
1.供免疫用的動(dòng)物主要是哺乳動(dòng)物和禽類，常選擇家兔、綿羊、山羊、馬、騾和豚鼠及小鼠等。動(dòng)物的選擇常根據(jù)抗體的用途和量來決定，也與抗原的性質(zhì)有關(guān)。如要獲得大量的抗體，多采用大動(dòng)物；如要是獲得直接標(biāo)記診斷的抗體，則直接采用本動(dòng)物；如要獲得間接的標(biāo)記診斷用抗體，則必須用異源動(dòng)物制備抗體；如果難以獲得的抗原，且抗體的需要量少，則可以采用純系小鼠制備；一般實(shí)驗(yàn)室采用的抗體，多用兔和羊制備。  
2.免疫用的動(dòng)物{zh0}選擇適齡的健康雄性動(dòng)物，雌性動(dòng)物特別動(dòng)物用于制備免疫抗體則非常不合適，有時(shí)甚至不產(chǎn)生抗體。由于對免疫應(yīng)答的個(gè)別差異，免疫時(shí)應(yīng)同時(shí)選用數(shù)只動(dòng)物進(jìn)行免疫。  抗原是多種多樣的，而且千差萬別。就其化學(xué)成分而言，有蛋白質(zhì)抗原、類脂抗原、多糖類抗原和核酸抗原等。就抗原性而言，有wanquan抗原和不wanquan抗原。為了獲得較好的抗血清，{zh0}是選用蛋白質(zhì)抗原，如要制備用于篩選表達(dá)的cDNA文庫或免疫印跡的抗血清，{zh0}選用可降解的蛋白質(zhì)抗原。不同的抗原，其免疫原性的強(qiáng)弱均不相同，這種免疫原性的強(qiáng)弱取決于抗原的分子量、化學(xué)活性基團(tuán)、立體結(jié)構(gòu)、物理形狀和彌散速度等。
3.抗原的免疫劑量是依照給予動(dòng)物的種類、免疫周期以及所要求的抗體特性等不同而不同。劑量過低，不能引起足夠強(qiáng)的免疫刺激，免疫劑量過多，有可能引起免疫耐受。在一定的范圍內(nèi)，抗體的效價(jià)是隨注射劑量的增加而增高。蛋白質(zhì)抗原的免疫劑量比多糖類抗原寬。一般而言，小鼠的首次免疫劑量為50μg～400μg/次，大鼠為100μg～1 000μg／次，兔為200μg～1 000μg/次。加強(qiáng)計(jì)量為首次劑量的1／5～2／5。  
4.免疫劑量與注射途徑有關(guān)，一般而言，靜脈注射劑量大于皮下注射，而皮下注射又比掌內(nèi)和跖內(nèi)皮下注射劑量大，也可采用淋巴結(jié)內(nèi)注射法。加佐劑比不加佐劑的注射劑量要小，對家兔而言，采用弗氏wanquan佐劑，則需注射0.5mg～1mg/kg./次，如采用弗氏不wangquan佐劑則注射劑量應(yīng)大10倍以上。如要制備高度特異性的抗血清,可選用低劑量抗原短程免疫法。如需要獲得{gx}價(jià)的抗血清，宜采用大劑量長程免疫法。免疫周期長者，可少量多次。免疫周期短者，應(yīng)大量少次。  
5.兩次注射的間隔時(shí)間應(yīng)長短適宜,太短起不到再次反應(yīng)的效果，太長則失去了前一次激發(fā)的敏感作用。一般間隔時(shí)間應(yīng)為5~7天，加佐劑者應(yīng)為2周左右。  
6.注射的Ig純度高，則一般不易引起過敏反應(yīng)，如注射血清，即使是少量，在再次免疫時(shí)，極易引起過敏反應(yīng)，所以一定要采取措施。




兔抗人UDP-N-乙酰葡糖胺：betaGal的β-1,3-N-二乙酰氨基3多克隆抗體抗體的鑒定        
1.抗體的效價(jià)鑒定:不管是用于診斷還是用于zhiliao，制備抗體的目的都是要求較{gx}價(jià)。不同的抗原制備的抗體，要求的效價(jià)不一。鑒定效價(jià)的方法很多，包括有試管凝集反應(yīng)、瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)、酶聯(lián)免疫吸附試驗(yàn)等。常用的抗原所制備的抗體一般都有約成的鑒定效價(jià)的方法，以資比較。如制備抗抗體的效價(jià)，一般就采用瓊脂擴(kuò)散試驗(yàn)來鑒定。      
2.抗體的特異性鑒定:抗體的特異性是指與相應(yīng)抗原或近似抗原物質(zhì)的識(shí)別能力?？贵w的特異性高，它的識(shí)別能力就強(qiáng)。衡量特異性通常以交叉反應(yīng)率來表示。交叉反應(yīng)率可用競爭抑制試驗(yàn)測定。以不同濃度抗原和近似抗原分別做競爭抑制曲線，計(jì)算各自的結(jié)合率，求出各自在IC50時(shí)的濃度。如果所用抗原濃度IC50濃度為pg/管，而一些近似抗原物質(zhì)的IC50濃度幾乎是無窮大時(shí)，表示這一抗血清與其他抗原物質(zhì)的交叉反應(yīng)率近似為0，即該血清的特異性較好。   
3.抗體的親和力  是指抗體和抗原結(jié)合的牢固程度。親和力的高低是由抗原分子的大小、抗體分子的結(jié)合位點(diǎn)與抗原決定簇之間立體構(gòu)型的合適度決定的。有助于維持抗原抗體復(fù)合物穩(wěn)定的分子間力有氫鍵、疏水鍵、側(cè)鏈相反電荷基因的庫侖力、范德華力和空間斥力。親和力常以親和常數(shù)K表示，K的單位是L/mol，通常K的范圍在108～1010/mol，也有多達(dá)1014/mol。抗體親和力的測定對抗體的篩選，確定抗體的用途，驗(yàn)證抗體的均一性等均有重要意義。


抗血清的凍存  
抗血清收獲后，加1/萬硫柳汞或1/萬的疊氮鈉防腐，或加入等量的中性甘油，分裝小瓶，置-20℃以下的低溫保存，數(shù)月至數(shù)年內(nèi)抗體效價(jià)無明顯變化。注意避免反復(fù)凍融。也可將抗血清冷凍干燥后保存。


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