1．概述 本檢測(cè)采用酶聯(lián)免疫法定量檢測(cè)麻痹性貝類毒素的存在。神經(jīng)性貝毒是一種毒素，石房蛤毒素是麻痹性貝類毒素的一種。本檢測(cè)可用于水產(chǎn)樣本對(duì)貝類毒素的定性和定量檢測(cè)，例如甲殼類動(dòng)物的樣本。對(duì)于甲殼類動(dòng)物的需要提前制備樣本。如果條件允許，陽(yáng)性樣本可以做HPLC，GC/MS或其他方法確認(rèn)。 2．安全性說(shuō)明 標(biāo)準(zhǔn)品溶液含有少量的石房蛤毒素。底物溶液含有四甲基聯(lián)苯胺，終止液還有稀硫酸。避免皮膚與粘膜與終止液接觸。若終止液與皮膚接觸，可用水洗去。 3．貯藏與穩(wěn)定性 試劑盒貯存在4-8°C。使用前試劑盒中溶液要恢復(fù)到室溫（20—25度）。在保質(zhì)期內(nèi)試劑盒都可以正常使用。 4．檢測(cè)原理 本實(shí)驗(yàn)采用直接競(jìng)爭(zhēng)ELISA方法，用特異性抗體識(shí)別石房蛤毒素。樣本中的石房蛤毒素可與石房蛤毒素-酶結(jié)合物競(jìng)爭(zhēng)，同包被在微孔板上的兔抗-石房蛤毒素抗體結(jié)合。石房蛤毒素抗體與包被在微孔底部的二抗結(jié)合。洗板后加入底物溶液，顯藍(lán)色。藍(lán)色的深度與石房蛤毒素在樣本中的濃度成反比。顏色反應(yīng)在規(guī)定時(shí)間內(nèi)終止，顏色用酶標(biāo)儀讀值。每孔的樣本濃度值可以通過(guò)標(biāo)準(zhǔn)曲線來(lái)讀取。 A.試劑盒組成 1．真空包裝微孔板（12×8條），包被一種羊抗兔二抗 2．標(biāo)準(zhǔn)液（6）：0, 0.02, 0.05, 0.1,0.2和0.4 ng/mL (ppb) 3．1瓶6mL抗體（兔抗石房蛤毒素抗體） 4．1瓶6mL石房蛤毒素-HRP酶標(biāo)記物 5．2瓶25ml樣品稀釋緩沖液(10倍濃縮)(即用即配，例如：10ml濃縮緩沖液+90ml蒸餾水) 6．1瓶100ml洗板緩沖液(5倍濃縮) (即用即配，例如：10ml濃縮緩沖液+40ml蒸餾水) 7．1瓶12 mL底物（顯色液TMB） 8．1瓶12mL終止液 C.操作步驟 1、在對(duì)應(yīng)的微孔中加入50μL的標(biāo)準(zhǔn)和樣品（推薦做2-3個(gè)重復(fù)） 2、每個(gè)測(cè)試孔都加入50 μL石房蛤毒